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液相色譜柱使用的注意事項

更新時間:2021-07-19  |  點擊率:1964
使用液相色譜柱做HPLC分析時,通常會遇到一些問題,下面為大家介紹幾點液相色譜柱使用的注意事項:
 
1、避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動
溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此,在調節流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。
 
2、應逐漸改變溶劑的組成
特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變為全部是水,反之亦然。
 
3、一般說來色譜柱不能反沖
只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。
 
4、選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。
有時可以在進樣器前面連接一預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。
 
5、經常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保留在柱內的雜質。
在進行清洗時,對流路系統中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右。
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