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島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點?

更新時間:2022-04-24  |  點擊率:2072
島津液相色譜柱按分析成分可分為反向色譜柱,HILIC色譜柱,正相色譜柱,離子交換色譜柱,制備液相色譜柱,毛細管液相色譜柱,聚合物基質色譜柱,專用色譜柱等,島津液相色譜柱具有高惰性、高保留和低柱壓,性價比高。
 
島津高效液相色譜柱選擇的條件有哪幾點?
 
1、填料基質
 
(1)硅膠基質:純度高本錢低,強度大,化學修飾輕易,但pH值范圍有限。大多硅膠基質填料在pH2-8之間穩定,但經過特殊修飾的硅膠鍵合相可以穩定在pH1.5-10。
(2)聚合物基質:應用pH值范圍寬,溫度穩定(高溫可以達到80度以上),機械強度小。
 
2、顆粒外形
 
大多現代HPLC填料都是球形顆粒,但有時是不規則的顆粒。球形顆粒提供較低的柱壓、較高的柱效和穩定性以及較長的島津高效液相色譜柱壽命在使用高粘度的活動相時;不規則顆粒有較大比表面積和相對低廉的價格。
 
3、顆粒粒徑
 
粒徑越小柱效越高、分離度越高,但同時會導致較高柱壓降。選擇1.5-3μm的填料以解決一些復雜樣品,UPLC可以使用1.5μm的填料;另外10μm或更大粒徑的填料用作半制備或制備柱。
 
4、含碳量
 
含碳量指的是硅膠表面鍵合相的比例,與比表面積和鍵合覆蓋度等有關。高含碳量進步柱容量、分辨率及分析時間,用于要求高分離度的復雜樣品;低含碳量分析時間短、展現不同的選擇性,用于快速分析簡單樣品及需要高含水活動相條件的樣品。一般C18的含碳量在7-19%不等。
 
5、孔徑和比表面積
 
HPLC吸附介質是多孔的顆粒,盡大多數的反應表面于孔內。因此,分子必須進進孔內才能被吸附和分離。孔徑和比表面積是相輔相成的兩個概念。孔徑小比表面積大,反之亦然。島津高效液相色譜柱比表面積大,增加樣品與鍵合相之間的反應,增加保存,上樣量和復雜成分的分離度;比表面積小,平衡時間快,適合梯度分析。
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